蛋白质分子量测定_质谱分析_百泰派克生物
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圆二色性光谱有哪些优势和局限?
圆二色性光谱(Circular Dichroism, CD)作为研究生物大分子构象的光谱技术,因其操作简便、数据直观,在结构生物学和生物物理学领域中被广泛应用。尤其是在蛋白质、核酸等手性分子的二级结构分析、构象变化监测以及分子间相互作用研究中,CD光谱是一种不可替代的技术手段。然而,正如所有实验技术
从血浆到组织:多种样本类型的DIA-MS分析解决方案
在蛋白质组学研究中,样本类型的复杂性和实验数据的可重复性往往难以兼顾。如何在血浆、组织、细胞和体液等多种生物样本中实现高通量、低偏倚的定量分析,是当前质谱技术持续优化的核心命题。数据独立采集质谱(Data-Independent Acquisition, DIA-MS)以其高覆盖率、良好重复性和缺失
翻译后修饰蛋白质组学:检测原理与富集策略解析
蛋白质翻译后修饰(Post-translational modifications, PTMs)是调控细胞功能的核心机制,广泛参与信号转导、细胞周期、代谢重编程等生物过程。系统研究PTMs的变化,对于揭示疾病机制和发现生物标志物具有重要意义。随着质谱技术的快速发展,翻译后修饰蛋白质组学(PTM pr
单细胞蛋白组如何高通量定量?TMT标记全攻略
细胞是生命活动的基本单元,然而即使同源细胞在相同环境中也可能呈现出显著的功能差异。这种细胞间异质性在癌症、免疫、发育等研究中被认为具有重要生物学意义。单细胞RNA测序近年来发展迅速,TMT标记(Tandem Mass Tag)成为单细胞蛋白质组定量中广泛采用的核心策略,凭借其高通量、多通道定量能力,
利用MALDI-TOF质谱技术进行蛋白质N-端序列分析
蛋白质的N-端序列分析是解析蛋白质功能、翻译后修饰及生物合成机制的重要手段。传统的Edman降解法是经典的N-端测序技术,但其在复杂样本中的应用受限。近年来,基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)以其高灵敏度、快速检测能力和宽动态范围,在蛋白质N-端序列分析方面展现出重要应用
如何利用LC-MS/MS提高C端测序的灵敏度和准确性?
在基于LC-MS/MS的C端测序中,灵敏度和准确性的提升需通过样品处理、仪器参数优化及数据分析策略的系统性协同改进。以下是关键优化方向: 1、选择合适的蛋白酶及样品制备策略 C端测序的关键在于获得高效、特异的C端肽段。常规酶(如胰蛋白酶)主要针对特定氨基酸切割,而非特异性酶(如蛋白酶K)或特定C端
如何通过蛋白全长测序验证复杂异构体的存在?5步操作指南
在蛋白表达系统中,即使来源于同一基因,所产生的蛋白质也可能因剪接变异、翻译起始差异、翻译后修饰或降解途径不同,形成多个结构相似但功能各异的蛋白质异构体(protein isoforms)。这些异构体广泛存在于天然蛋白中,尤其在抗体药物、融合蛋白及重组酶等生物制品开发过程中,其微小的结构差异可能对蛋白
为什么Edman降解仍然重要?探索其不可替代的应用场景
在质谱技术主导蛋白质组学的时代,Edman降解似乎成了“过去式”。但事实并非如此。作为一种经典且精准的N端蛋白质测序方法,Edman降解在多个关键场景中依然有着不可替代的价值,尤其是在蛋白质结构验证、药物质量控制以及非模式生物的研究中。本文将深入解析Edman降解的原理与优势
De Novo测序和同源性搜索,如何协同分析?
在蛋白组学研究中,数据库搜索(Database Search)仍是主流分析方式,但它高度依赖现有数据库的完整性与准确性。当我们面对的是非模式生物、天然产物、抗体片段或翻译起始位点变异的肽段时,数据库可能无法匹配这些“新序列”,导致错配或完全漏报。 这时,De Novo测序(